豬肝微粒體的規模化制備、活性鑒定與長期保存策略

2025-11-17 一、規?；苽洳呗越M織采集與預處理選擇健康成年豬，迅速剖取肝臟后立即用預冷的生理鹽水或勻漿介質（如含0.1mmol/LEDTA的0.25mol/L蔗糖-Tris-HCl緩沖液，pH7.4）沖洗，去除殘留血液和結締組織。肝臟剪碎后按1:3-1:5（w/v）比例加入緩沖液，使用勻漿器在低溫下勻漿至無可見顆粒，制成肝勻漿。差速離心分離將勻漿液在4℃條件下進行梯度離心：第一步離心：600-1000g離心5-10分鐘，去除細胞核、線粒體等沉淀，收集上清液。第二步離心：將上清液于10,0...

微粒體定制系列（九）——兔肝微粒體Rabbit Liver Microsomes

2025-11-12 引言歡迎大家來到#齊氏生物##微粒體#定制系列短文，兔肝微粒體（（RabbitLiverMicrosomes）因其在代謝特征上與人類較高的相似性，尤其對睪酮的羥基化代謝模式（主要產生6β-羥基睪酮）與人類高度一致，這使其成為研究經CYP3A4和CYP2C代謝藥物的理想模型。一、兔肝微粒體RabbitLiverMicrosomes作為體外藥物代謝研究工具，兔肝微粒體（RabbitLiverMicrosomes）是兔肝組織經勻漿和差速離心后獲得的內質網囊泡結構，富含Ⅰ相代謝酶（如...

“修復者”TA102的低變之謎

2025-10-31 引言上個月在嘉興的藥物安評毒理年會上，齊氏生物團隊和多位老師聊到#TA102菌株#，大家一致反映TA102在Ames試驗中表現出的“不敏感”，即回復突變率“較低”甚至個別試驗沒有突變。針對這個問題，今天從遺傳構造和檢測原理角度淺談一下，揭示其背后的“清潔工”機制，并提供相關解決思路，希望給同行老師們提供一些參考。在Ames試驗中觀察到TA102菌株的自發回變菌落數（即突變率）相對“較低”，其實是一個常見的現象。這并非意味著TA102不敏感，而是由其獨特的遺傳構造和檢測原理決定...

拯救你的原代細胞：從識別鉀離子毒性開始

2025-10-30 引言開學以來，陸續收到細胞群（QQ:386500167)里關于細胞凋亡的咨詢，情形很類似，大概原代細胞剛開始培養不錯，但在1-2天內發生大面積凋亡。今天從鉀離子過高的角度，詳細解釋下導致這種“延遲性”的凋亡，并提供一套完整的排查思路和解決方案，供大家參考！為什么鉀離子過高會導致“延遲性”大面積凋亡？原代細胞不像永生化細胞系那樣耐受性強，它們對微環境的變化極其敏感。鉀離子的影響不是像消毒劑那樣瞬間殺滅，而是通過破壞細胞的基本穩態，最終觸發凋亡程序。這個過程需要時間，從而表現為“...

一文與您分享成纖維抑制劑的正確使用方法

2025-10-23 成纖維抑制劑能有效阻止或延緩不溶性纖維狀沉淀物（如硅酸鹽、碳酸鈣、金屬氫氧化物等）的形成與聚集，廣泛應用于反滲透系統阻垢、實驗室樣品防凝膠化、細胞培養基穩定及高濃度溶液儲存等場景。然而，若使用不當，不僅難以發揮功效，還可能干擾后續實驗或造成設備損傷。掌握成纖維抑制劑正確使用方法，是實現精準的核心。一、明確目標，選對類型成纖維抑制劑種類繁多，作用機制各異。常見的有聚丙烯酸類、膦酸鹽類、有機磷酸酯類及天然聚合物（如檸檬酸鹽）。使用前需明確抑制對象：針對硅垢應選用硅分散劑，防鈣垢則...

纖維細胞試劑盒的工作原理與獨特優勢

2025-10-22 纖維細胞試劑盒，尤其是基于酶聯免疫吸附試驗（ELISA）原理的試劑盒，是生物醫學研究和臨床診斷中的重要工具，其工作原理與獨特優勢如下：工作原理纖維細胞試劑盒（以成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒為例）主要基于雙抗體夾心法或競爭法原理工作：雙抗體夾心法：將特異性抗體包被在微孔板上作為固相抗體，加入樣本后，樣本中的抗原（如成纖維細胞生長因子）與固相抗體結合。隨后加入酶標記的特異性抗體，形成固相抗體-抗原-酶標抗體復合物。經過洗滌去除未結合的成分后，加入底物顯色，通過酶標儀測定吸光...

人乳腺成纖維細胞試劑盒是腫瘤研究與藥物篩選的重要工具

2025-10-16 人乳腺成纖維細胞是乳腺組織微環境中的關鍵間質細胞，參與乳腺發育、組織修復及腫瘤微環境調控。人乳腺成纖維細胞試劑盒為科研人員提供了原代細胞株、專用培養基與配套試劑，大大簡化了細胞培養流程，成為乳腺生物學、腫瘤研究與藥物篩選的重要工具。第一步：準備工作與環境消毒在生物安全柜內操作，提前開啟紫外燈照射30分鐘。實驗人員需穿戴無菌手套、實驗服與口罩。將水浴鍋預熱至37℃，CO2培養箱設定為37℃、5%CO2、飽和濕度。檢查試劑盒內各組分是否齊全、未過期。第二步：細胞復蘇與接種從液氮罐...

微粒體定制系列（八）——豚鼠肝微粒體（Guinea pig liver microsomes）

2025-09-29 引言歡迎來到#齊氏生物#微粒體定制#系列短文，CYP2D6負責代謝約25%人用臨床常用藥物，包括許多抗抑郁藥、抗精神病藥、β-受體阻滯劑等，豚鼠肝微粒體（Guineapiglivermicrosomes）的獨特作用主要體現在其代謝酶譜與人類的高度相似性上，尤其是經由CYP2D6代謝的候選藥物，代謝途徑上與人類更高相似性，這是豚鼠肝微粒體重要的價值所在。一、豚鼠肝微粒體（Guineapiglivermicrosomes）豚鼠肝微粒體（Guineapiglivermicrosom...