常見問題:
細胞生長緩慢或狀態不佳:可能由于培養基選擇不當、血清品質不佳或培養條件不適宜導致。
細胞貼壁不良:可能因胰蛋白酶消化過度、未清洗干凈EDTA或培養基中缺乏貼壁因子引起。
細胞污染:包括細菌、真菌或支原體污染,主要由無菌操作不當或培養基、血清污染導致。
培養基變質:表現為沉淀物顏色或外觀變化,可能因儲存條件不當或頻繁溫度變化引起。
解決方案:
優化培養基與血清選擇:確保使用適合細胞類型的培養基,并選擇品質可靠的血清。若細胞生長緩慢,可嘗試更換培養基品牌或添加特定生長因子。
調整消化與清洗條件:控制胰蛋白酶消化時間,避免過度消化;消化后用PBS反復清洗培養皿,確保去除殘留EDTA。
加強無菌操作:使用前用75%乙醇擦拭超凈臺,紫外照射30分鐘以上;操作過程中盡量接近酒精燈,避免污染;定期更換孵箱底盤中的水,并消毒孵箱。
改善培養基儲存條件:將培養基儲存在4℃條件下,避免頻繁溫度變化;使用前檢查培養基外觀,如有變質跡象則丟棄不用。